CX23顯微鏡用于皮膚真菌檢測
CX23顯微鏡用于皮膚真菌檢測
CX23顯微鏡用于皮膚真菌檢測
皮膚寄生蟲檢測：皮膚寄生蟲檢測一般包括病原學檢查方法、免疫學檢查方法和分子生物學檢查。
1.病原學檢查：臨床上常取病人標本置于玻片上，滴一滴生理鹽水或碘液，在光學顯微鏡下觀察寄生蟲形態(tài)。病原學檢查是一種常用、簡便的皮膚寄生蟲檢測方法,但檢出率偏低，容易造成漏診。
2.免疫學檢查方法：常見的包括皮內(nèi)試驗和血清免疫學試驗，靈敏度及特異性均較高。這些方法主要用于檢測寄生蟲的特異性抗體，目前也已建立檢測蟲體循環(huán)抗原或排泄抗原的方法，以作早期診斷及療效的考核。
3.分子生物學檢查：DNA探針雜交技術、聚合酶鏈反應(PCR)檢測部分寄生蟲的DNA。此法對部分寄生蟲進行了分類鑒定，并對其重要功能基因進行克隆和篩選，已成為診斷和研究寄生蟲病的重要手段，但目前由于技術限制并未普及。
熒光染色法：熒光染色法通過使用化學熒光增白劑，與組織樣品的β-多糖物質相結合，如纖維素、幾丁質等。在熒光顯微鏡的紫外激發(fā)光下呈現(xiàn)熒光。通過熒光染料與真菌細胞壁及寄生蟲的多糖成分非特異性結合，能夠對真菌和寄生蟲感染導致的各種疾病進行檢測。早在上個世紀八十年代，就有研究者發(fā)現(xiàn)一種熒光增白劑能標記真菌細胞壁的幾丁質成分，并開始使用熒光法檢測真菌。國內(nèi)外已經(jīng)有很多實驗證實了熒光染色法具有陽性率高的優(yōu)點。
然而目前熒光染色法未能得到廣泛應用，終其原因主要有以下幾個方面的問題。首先，熒光染色法一般需要三種主要成分，包括熒光增白劑、氫氧化鉀和背景復染劑。熒光增白劑與組織中β-多糖成分相結合，產(chǎn)生熒光；氫氧化鉀能溶解樣品組織中的角質、消除雜質，并使組織透明；而背景復染劑能降低樣品組織的背景亮度，使熒光信號更加清晰。然而，由于熒光增白劑在強堿環(huán)境中穩(wěn)定性差，熒光素會發(fā)生析出沉淀現(xiàn)象；而且背景復染劑也會影響熒光增白劑的穩(wěn)定性，會引起檢測靈敏度的降低，甚至無法對真菌染色。因此，在現(xiàn)有技術下，熒光染色法所需的這三種染色液成分無法穩(wěn)定長期共存，需分別配制儲存，染色時需要三個步驟才能完成，操作上相對繁瑣，染色時間相對較長，據(jù)早期文獻記載，整個染色過程需要20分鐘。隨著技術的進步，現(xiàn)在市面上已經(jīng)有熒光染色兩步法的試劑盒，操作步驟得到簡化，染色時間也相對縮短，但依舊無法達到臨床對真菌及皮膚寄生蟲快速篩查的要求。其次，此方法對檢測的標本具有局限性，只能溶解一些雜質少的標本，而對于痰液、厚甲標本和大的腳皮，染色效果很差。因此此方法的臨床適用范圍得到限制。
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