| MicroRNA前體表達(dá) |
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復(fù)能基因現(xiàn)在提供: 1048條人源、672條小鼠源、408條大鼠源miRNA插入各種表達(dá)載體中構(gòu)建的miExpress?microRNA前體表達(dá)克隆。 miRNA靶標(biāo)的表達(dá)克隆編碼基因的3’端非翻譯區(qū)（3’－UTR）涵蓋了人類編碼基因20000個(gè)miRNA靶標(biāo)表達(dá)克隆。（3’－UTR，即編碼基因的3’端非翻譯區(qū)） 利用這些miRNA表達(dá)克隆研究相應(yīng)基因或者蛋白的表達(dá)調(diào)節(jié)情況。配合采用熒光素酶報(bào)告基因的靶標(biāo)克隆，可以和miRNA表達(dá)克隆一起進(jìn)行miRNA功能篩選合確證，以及miRNA靶標(biāo)基因的篩選和確證的交互實(shí)驗(yàn)。 復(fù)能基因同時(shí)也提供多套的人類基因組和小鼠基因組的全長(zhǎng)基因ORF表達(dá)克隆。用于miRNA靶標(biāo)的對(duì)應(yīng)蛋白的功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)。由于這些ORF克隆不含3’－UTR，可以用于特種miRNA對(duì)內(nèi)源靶基因抑制后的拯救實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步確證miRNA功能及靶標(biāo)基因。 miExpress?人類基因組的miRNA前體表達(dá)克隆 復(fù)能基因采用基于貓免疫缺陷病的慢病毒系統(tǒng)，構(gòu)建了miRNA前體表達(dá)克隆的載體骨架。RNA聚合酶III型的H1啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄前體miRNA的莖環(huán)前體（大約有150核苷酸長(zhǎng)度）。隨后通過(guò)RNAi的酶系加工生成成熟的miRNA。使得在同一載體的CMV啟動(dòng)子的驅(qū)動(dòng)下共表達(dá)報(bào)告基因eGFP，雙順?lè)醋酉掠蔚男旅顾睾Y選基因也同時(shí)表達(dá)？勺鳛楸O(jiān)測(cè)miRNA表達(dá)，轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)化的效率的參考標(biāo)準(zhǔn)。 RISC－miRNA復(fù)合體通過(guò)結(jié)合靶基因的mRNA的3’非編碼區(qū)（3’－UTR）成功地調(diào)節(jié)靶基因。1）表達(dá)水平和翻譯水平的抑制；2）mRNA的被切割，被降解和豐度的下降。 MicroRNA前體表達(dá)克隆 http://www.ebioeasy.com.cn/ParentList-2186898.html https://www.chem17.com/st192696/product_35303286.html |
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