| 石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-微量 |
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價(jià)格： 元(人民幣) | 產(chǎn)地：上海 |
| 最少起訂量：1盒 | 發(fā)貨地：上海 | |
| 上架時(shí)間：2017-11-03 10:17:13 | 瀏覽量：201 | |
上海億欣生物科技有限公司
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| 經(jīng)營(yíng)模式：批發(fā)零售 | 公司類型：私營(yíng)合伙企業(yè) | |
| 所屬行業(yè)：化學(xué)試劑 | 主要客戶：實(shí)驗(yàn)室 病理室 研究所 | |
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石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-微量 產(chǎn)品貨號(hào)：EY-TG-42-50/100/200 包裝：50T/100T/200T 價(jià)格：2958/5756/11352 產(chǎn)品介紹 樣本直接提取無需脫蠟，方便用戶。在產(chǎn)品獨(dú)有的緩沖液體系的作用下， DNA從石蠟包被樣本中快速釋放，吸附于高性能的固相基質(zhì)，洗脫后即可獲 得高純度 DNA。提取到的核酸純度高于市場(chǎng)上的各種同類試劑盒，可適用于 多種下游應(yīng)用。 存儲(chǔ)和穩(wěn)定性 試劑盒（Proteinase K、RNaseA 除外）儲(chǔ)存在環(huán)境溫度-40℃~40℃，相 對(duì)濕度不大于 75%，無腐蝕性氣體的避光處。Proteinase K（固體）和 RNaseA（固體）長(zhǎng)期保存應(yīng)置于 2~8℃。如兩酶溶解后未能短時(shí)間用 完，應(yīng)分別按每次用量分裝成小份后-20℃保存?zhèn)溆。避免反?fù)凍融造 成酶活力下降。 -保質(zhì)期：12 個(gè)月。 使用前準(zhǔn)備 -閱讀說明書，備好必需的試劑和儀器。需自備的試劑、耗材有三氯甲 烷（氯仿）、無水乙醇、純水、PBS(10 mM，pH7.4，福爾馬林固定組 織選用)、1.5 ml 離心管等。全部離心均室溫進(jìn)行。 -若低溫導(dǎo)致溶液 UL 析出沉淀，可在 50℃左右水浴中重新溶解，搖勻 后使用。 -首次使用前，向每瓶溶液 W2 中按瓶上標(biāo)簽要求加入指定量的無水乙 醇（自備），搖勻后標(biāo)記備用。每管 Proteinase K 或 RNase A 首次使 用前分別用 275 μl 純水（自備）完全溶解。 -盒中的 1.5 ml 離心管專用于收集步驟“9”的洗脫液，勿移用。 提取步驟 1．樣本處理 石蠟切片：取石蠟切片（5~10 μm 厚，1×1 cm2 大。2~4 張于 1.5 ml 離 心管（自備）中。至步驟“2”。 石蠟塊：取刀片刮取或切成薄片的組織樣本 2~4 mg 于 1.5 ml 離心管（自 備）中，至步驟“2”。 注：盡量剔除石蠟(石蠟不會(huì)影響消化但是會(huì)使消化體積過大。另外盡量 不要使用蠟塊樣品表面長(zhǎng)期暴露于空氣中的組織。 福爾馬林等固定液中的樣本：取樣本 2~4 mg，切為數(shù)塊，置于 1.5 ml 離 心管中。用 PBS 緩沖液重復(fù)清洗 3 次后，至步驟“2”。 PBS 清洗方法（單次）：向管中加入 500 μl PBS 緩沖液 (10 mM，pH7.4)， 渦旋振蕩混勻后最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上）離心 1 min， 棄去上清。 2.向樣本中加入溶液 UL 300 μl（樣本應(yīng)完全浸沒于溶液 UL 中，必要時(shí)可 短暫離心），80 ℃孵育 60 min（期間每 15 min 取出混勻一次）。 3.取出離心管后將其冷卻至 56 ℃以下（室溫放置 2~ 3 min 即可），加入 Proteinase K 5 μl 及 RNaseA 5 μl，渦旋混勻。置 56 ℃孵育 60 min 或直 至組織完全消化。 4.加入三氯甲烷 300 μl，渦旋 15 sec，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以 上）離心 5 min。取出離心管，取上層清液至 1.5 ml 離心管（自備）中， 加入清液 1.1 倍體積的無水乙醇，渦旋混勻。 注意！勿吸入上層清液下的雜質(zhì)，雜質(zhì)會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。 5.將混勻液全部移入套有收集管的微量離心柱中，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上）離心 1 min。取出離心柱后棄去收集管中廢液，將離心 柱放回收集管中。 6.向離心柱中加入 250 μl 溶液 W2，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上） 離心 30 sec。取出離心柱后棄去收集管中廢液，將離心柱放回。 7.重復(fù)步驟“6”一次。 8.最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上）離心 2 min。 9.將離心柱取出并放入新的 1.5 ml 離心管中。向離心柱中加入 5~ 20 μl 溶液 TE，室溫靜置 2~3 min，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上）離心 1 min。 DNA 溶液即被收集在 1.5ml 離心管中。 注：將溶液 TE 預(yù)熱至 50~60℃時(shí)使用，可提高洗脫效率。 【注意事項(xiàng)】 -按說明書內(nèi)容進(jìn)行操作，違規(guī)操作可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。 -盒中試劑如不慎濺到皮膚或粘膜時(shí)，立即用大量清水沖洗。 -僅用于科學(xué)研究。 |
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