HPLC分析中，樣品需要衍生化處理的目的在于將不適用于液相色譜分析的物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橐子诜治龅难苌�，通過(guò)改善化合物的物理化學(xué)性能從而改變其選擇性，提高待分析物的檢測(cè)靈敏度，常用的方法是給不能被檢測(cè)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)中加入發(fā)色團(tuán)，使其能夠被檢測(cè)。柱前衍生是目前應(yīng)用廣泛的衍生技術(shù)。
柱前衍生是指待測(cè)物在液相色譜分離前就完成衍生化，再根據(jù)衍生物的性質(zhì)進(jìn)行色譜分離檢測(cè)，若衍生過(guò)程所用的試劑若能穩(wěn)定存在，且衍生反應(yīng)條件成熟可靠時(shí)，其優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在對(duì)設(shè)備要求不高，可以人工衍生，且衍生后的副產(chǎn)物可以經(jīng)過(guò)預(yù)處理步驟除去，相應(yīng)的，手工衍生化過(guò)程會(huì)受到人為因素的影響。
柱后衍生是指待測(cè)物先經(jīng)過(guò)色譜分離后，然后進(jìn)入反應(yīng)器中與衍生化試劑反應(yīng)，后進(jìn)入檢測(cè)器的衍生化方法。該方法可以實(shí)現(xiàn)分析的自動(dòng)化，反應(yīng)重現(xiàn)性好，不影響被測(cè)物的色譜行為，但不利點(diǎn)在于需要配備額外的反應(yīng)裝置和反應(yīng)設(shè)備，過(guò)長(zhǎng)的設(shè)備管線會(huì)使從色譜柱中出來(lái)的樣品在管路中造成峰擴(kuò)展，導(dǎo)致分離度降低。
柱后衍生又稱(chēng)柱后反應(yīng)，利用衍生反應(yīng)使被測(cè)物與相應(yīng)的試劑分析反應(yīng)，以改變其物理或化學(xué)性質(zhì)，使其被檢測(cè)到。例如將發(fā)色基團(tuán)或熒光基團(tuán)鍵合到樣品中去，多極放大檢測(cè)靈敏度，柱后衍生系統(tǒng)開(kāi)創(chuàng)了柱后衍生系統(tǒng)性能、價(jià)格及外形的新標(biāo)準(zhǔn)。反應(yīng)器設(shè)計(jì)，造就了新一代柱后衍生系統(tǒng)高性能和低價(jià)格。
